Освещение — естественное и искусственное (лампы дневного света). Оптимальное развитие плодовых тел обеспечивается освещенностью 50-150 лк/ч в течение 8-10 часов в день. Рассеянный свет предпочтительнее, при использовании искусственного освещения синий или сине-фиолетовый спектр с длиной волны 530 нм является оптимальным.
Грибы выращивают в емкостях, способных выдержать термообработку автоклавированием при подготовке субстрата. Таким требованиям отвечают стеклянные емкости объемом 0,5–1 л (банки, бутылки, колбы), которые выдерживают стерилизацию субстрата и могут использоваться многократно. Стеклянные емкости обертывают куском термостойкой пленки, фольги или плотной бумаги и закрепляют на горловине. Подготовленные таким образом емкости поступают на стерилизацию.
При выращивании грибов в мешках из термостойкой пленки субстрат закладывают так, чтобы между ним и стенками мешка не возникло воздушных полостей. Это предотвратит рост плодовых тел гриба вдоль стенок мешка. Концы мешка стягивают кольцом из фольги или картона диаметром 5 см, в отверстие вставляют ватно-марлевую пробку и завязывают.
Грибы можно выращивать и в плоскодонных колбах, молочных бутылках и в других небольших по объему емкостях. Все емкости заполняют субстратом так, чтобы между крышкой и плоскостью субстрата оставалось воздушное пространство 1–2 см и не было касания с пробкой и крышкой.
Стерилизация. Подготовленные емкости с субстратом поступают на стерилизацию. Процесс стерилизации является одним из основных при выращивании зимнего опенка. В субстрате из различных растительных отходов содержится много посторонней микрофлоры, которая при росте гриба отрицательно влияет на освоение им субстрата и может вызвать гибель грибницы, поскольку опенок зимний обладает недостаточной стойкостью по отношению к посторонним микроорганизмам. Учитывая это, перед инокуляцией субстрат стерилизуют в автоклаве при 120 °C в течение 30 мин., а сильно загрязненный стерилизуют дважды с суточным перерывом между стерилизациями в том же режиме. После стерилизации емкости с субстратом охлаждают до температуры 25 °C и заражают грибницей (инокулируют).
Стерильные и охлажденные банки с субстратом перевозят в бокс для посева, где их инокулируют с соблюдением правил работы с микроорганизмами в лаборатории (боксе). Инокуляцию подготовленного субстрата проводят зерновой грибницей опенка зимнего, выращенной на овсе, пшенице, ржи, ячмене и других злаках в специализированных лабораториях по выращиванию инокулята.
Инокулят зимнего гриба можно приобрести по предварительному заказу в лаборатории. Приобретенную грибницу хранят в течение 2–3 месяцев в холодильниках при температуре 1–5 °C. Здоровая, жизнеспособная грибница упакована в полиэтиленовые мешки (по 1 кг), имеет кремово-белый цвет и приятный грибной запах.
Подготовка бокса к посеву. В боксе поддерживают стерильность, шкафы и столы предварительно протирают дезинфицирующим раствором хлорамина. Перед посевом в боксе размещают емкости с субстратом и включают бактерицидную лампу на 1 час.
Во время ее работы в боксе запрещается проводить любые работы: раскладывать емкости, грибницу, посевные инструменты, а также присутствовать постороннему обслуживающему персоналу. После отключения лампы входить в бокс для проведения посева можно только через 15 мин.
Посев грибницы в субстрат проводят с помощью дозированной узкой металлической ложки с длинной ручкой. Ложку перед посевом обрабатывают 96-процентным этанолом, обжигают над пламенем горелки или спиртовки. Продезинфицированной ложкой набирают грибницу, вносят ее в углубление в субстрате, затем крышку герметически закрывают. Количество грибницы составляет 3–5 % от массы субстрата.