Нами проведены исследования с целью изучения динамики формирования устойчивости бактерий к ЭМ. При этом было обнаружено, что через 15 пассажей антибактериальная доза стрептомицина возросла в 18 раз и составила 11 000 мкг/мл, в то время как противомикробная концентрация ЭМ монарды увеличилась только в 2 раза (390 мкг/мл). Следовательно, после 15 пассажей масло монарды действовало на St. aureus в 28 раз эффективнее, чем стрептомицин.
В подавляющем числе случаев максимально переносимая бактериями доза антибиотиков через 20—30 пассажей значительно повышалась и становилась практически равной максимально переносимой концентрации ЭМ. Так, конечная максимально переносимая доза масла монарды для E.coli через 20 пассажей составляла 0,85 мг/мл, а пенициллина за тот же период времени для этого же штамма — 3,24 мг/мл, стрептомицина — 2,66 мг/мл. Индекс резистентности был равен соответственно 4,6; 2969 и 120 833 (Р<0,0001).
Итак, к пенициллину и стрептомицину чувствительность микроорганизмов при пассировании их на питательных средах к антибиотикам резко снижается. Микроорганизмы при длительном контакте с ЭМ практически не вырабатывают к ним устойчивости, что является их существенным преимуществом перед антибиотиками и представляет интерес для медицины.
Таблица 2. Антимикробная активность (мкг/мл) эфирных масел, их фракций, компонентов и отходов вторичного сырья при производстве эфирных масел
Растения
Вид микроорганизмов
Staphylococcus aureus 209
Streptococcus pyogenes
Neisseria catarralis
Escheriehia coli 0-111
Proteus vulgaris
Klebsiella pneumoniae
Monarda fistulosa L. (монарда дудчатая)
250
125
125
400
400
400
Ocimum gratissimum L. (базилик эвгенольный)
200
125
>400
>400
>400
400
Lophantus L. (лофанг)
>400
250
250
>400
400
>400
Foemiculum vulgare Miller (фенхель обыкновенный)
200
>400
250
>400
>400
>400
Nepeta catoria L. (котовник лимонный)
400
250
**
>400
>400
>400
Pelargonium roseum L. (герань розовая)
>400
125
125
>400
>400
>400
Salvia officinalis L. (шалфей лекарственный)
>400
>400
—
>400
>400
>400
Artemisia pontica L. (полынь крымская)
>400
—
250
>400
>400
>400
Coriandrum sativum L. (кориандр посевной)
>400
400
250
>400
>400
>400
Abethum graveolus L. (укроп пахучий)
>400
>400
250
—
>400
>400
Mentha piperita L. (мята перечная)
>400
250
>400
>400
>400
400
Petroselinum sativum L. (петрушка посевная)
>400
400
>400
>400
>400
400
Zasepritium hispidum L. (гладыш щетинисто-волокнистый)
>400
—
400
>400
>400
400
Carum Ajowan L. (ажгон душистый)
>400
250
>400
>400
>400
400
Pogostamon patchouli (пачули)
200
—
—
>400
—
—
Satureja montana (чабер горный)
250
—
—
>400
—
—
Acorus calamus L. (аир болотный)
400
—
—
>400
—
—
Mentha piperita L. (мята-сырец)
400
—
—
>400
—
—
Cistus ladaniferus (ладанника экстракт)
400
—
—
>400
—
—
Elsholtcia stauntonii (эльшольция Стаунтона)
400
—
—
>400
—
—
Laurus nobilis L. (вторичное масло лавра благородного)
400
—
—
>400
—
—
Фенольная фракция эфирного масла монарды дудчатой
125
—
—
250
250
250
Тимол
250
—
—
400
400
400
.
Растения
Вид микроорганизмов
Pseudomonas aeruginosa
Bordetella bronchoseptica
Citrobacter OA
Enterobacter cloacae
Serratla marcescens
Monarda fistulosa L. (монарда дудчатая)
> 400**
400
>400
400
>400
Ocimum gratissimum L. (базилик эвгенольный)
>400
400
>400
>400
>400
Lophantus L. (лофанг)
>400
400
>400
>400
>400
Foemiculum vulgare Miller (фенхель обыкновенный)
>400
400
>400
>400
400
Nepeta catoria L. (котовник лимонный)
>400
400
>400
>400
>400
Pelargonium roseum L. (герань розовая)
>400
>400
>400
>400
>400
Salvia officinalis L. (шалфей лекарственный)
>400
400
400
—
>400
Artemisia pontica L . (полынь крымская)
>400
>400
>400
>400
>400
Coriandrum sativum L . (кориандр посевной)
>400
>400
>400
>400
>400
Abethum graveolus L . (укроп пахучий)
>400
>400
>400
—
>400
Mentha piperita L. (мята перечная)
>400
>400
>400
>400
>400
Petroselinum sativum L. (петрушка посевная)
>400
>400
>400
>400
400
Zasepritium hispidum L. (гладыш щетинисто-волокнистый)
>400
>400
>400
>400
>400
Carum Ajowan L. (ажгон душистый)
>400
>400
>400
>400
>400
Pogostamon patchouli (пачули)
>400
—
—
—
—
Satureja montana (чабер горный)
>400
—
—
—
—
Acorus calamus L. (аир болотный)
>400
—
—
—
—
Mentha piperita L. (мята-сырец)
>400
—
—
—
—
Cistus ladaniferus (ладанника экстракт)
>400
—
—
—
—
Elsholtcia stauntonii (эльшольция Стаунтона)
>400
—
—
—
—
Laurus nobilis L. (вторичное масло лавра благородного)
>400
—
—
—
—
Фенольная фракция эфирного масла монарды дудчатой
>400
125
250
250
250
Тимол
>400
>400
>400
400
400
Примечание. Перечень названий растений, из которых получены эфирные масла, приведен в соответствии с их бактерицидной активностью.
** >400 — действие эфирных масел на микроорганизмы малоэффективное. Исследование не проводилось.
Влияние белков крови на бектерицидную активность ЭМ. Антибиотики, обладающие высокой бактерицидной активностью, снижают ее при введении в организм на 10—36%. Причина этого заключается в блокировании действия антибиотиков белками сыворотки крови [Кашкин П.И., 1970].
Бактерицидная активность ЭМ в питательной среде с повышенным содержанием белка практически не снижалась. Так, St. aureus в опытных и контрольных пробах погибали при одинаковой концентрации масел: монарды — 250 мкг/мл и базилика — 200 мкг/мл, а при использовании ЭМ лавра и эвкалипта возрастала в 1,5— 2 раза, т.е. введение ЭМ в среду с повышенным содержанием белка незначительно отражалось на их бактерицидной активности, что выгодно отличает их от антибиотиков!
Синергизм ЭМ в их бактерицидном действии на микроорганизмы. Сочетание ЭМ эвкалипта с монардой или базиликом повышает их бактерицидную активность в 20 раз, ЭМ базилика с кориандром или линалилацетатом — в 30 раз, ЭМ монарды с полынью лимонной — в 20 раз. Смешивание же масла монарды и базилика снижает их антибактериальную эффективность в 2 раза.
Установлено, что пенициллин и стрептомицин индуцировали образование мутантных колоний достоверно чаще, чем при спонтанном росте или под действием ЭМ (соответственно 2,5 и 2,8, Р<0,05); 5-бромурацил вызывал мутации чаще (51,2), чем антибиотики (Р<0,01). Анализируя эти данные, можно считать, что ЭМ индуцируют мутации у микроорганизмов с такой же частотой, как и при спонтанных мутациях, т.е. не вызывают изменений в генетическом аппарате микробных клеток, не обладают мутагенным действием, каким обладают антибиотики и известный мутаген 5-бромурацил.