Близнецов у птиц вызывали и другими экспериментальными методами. Пользуясь методом Шпемана, трансплантировали кусочки различных тканей, могущих индуцировать образование в бластодерме добавочного зародыша — искусственного близнеца (Morita, 1936; Waddington, 1941). Эти явления аналогичны описанным у амфибий.
Путем механической изоляции — поперечным разрезом скальпелем — можно вызвать образование близнецов у утиного эмбриона (Lutz, 1953). Ориентация головы переднего партнера зависит от стадии гаструляции. Если разрез пройдет через участок, куда уже проникла образующаяся энтодерма (вспомним, что этот процесс идет от заднего конца будущего зародыша к переднему), то голова переднего близнеца будет ориентирована нормально, как и голова заднего, т. е. в одном направлении. Однако голова переднего эмбриона окажется ориентированной назад, навстречу голове заднего, если разрез провести на той стадии, когда энтодерма еще не образовалась в переднем участке. Это Лутц объясняет тем, что в этом последнем случае образование энтодермы потечет от переднего края бороздки, т. е. в обратном направлении, и потому голова переднего близнеца образуется у линии разреза, иначе говоря, будет обращена к голове заднего близнеца. Таким образом можно произвольно изменять относительное направление осей обоих близнецов.
Близнецов у птиц можно получить еще и другим приемом. На стадии ранней гаструляции, пока первичная полоска составляет одну четверть светлого поля бластодиска (area pellucida), наносится повреждение с помощью ультрафиолетового укола (по методу Чахотина) или электротока. В результате может возникнуть раздвоение процесса гаструляции и образование двоен, а изредка — троен. После того как первичная полоска достигла половины своей длины, близнецы этим методом уже не получаются (Twisselmann, 1939). Различные варианты получаемых близнецов зависели от конкретных условий опытов.
Таким образом, и стадия эмбриогенеза — не позже гаструляции, и приемы, вызывающие экспериментальное образование ОБ у птиц, в общем, аналогичны таковым у амфибий. Это говорит о сходстве по существу тех процессов, которые лежат в основе полиэмбрионии у этих животных.
Млекопитающие
Среди этих животных есть два вида из отряда неполнозубых: броненосцы-армадилы (Dasypus novemcinctus и D. hybridus), которые замечательны тем, что закономерно размножаются путем образования нескольких зародышей из одного яйца (пол близнецов одного помета всегда одинаковый). Первый вид обычно имеет четырех однояйцевых близнецов, второй — разное число (до 12). Это явление полиэмбрионии у млекопитающих в известной мере аналогично вышеописанным случаям у кольчатых червей и паразитических насекомых. У млекопитающих это очень редкое явление. Другие виды броненосцев размножаются обычным путем, ОБ у них не описаны. У многих видов млекопитающих ОБ явление далеко не постоянное, наоборот, как мы увидим из дальнейшего, ОБ у остальных видов млекопитающих скорее исключение, чем правило.
Оба вида броненосцев, имеющие ОБ, живут в Америке. Их удивительный способ размножения был давно известен. В науке он впервые описан в 1885 г. Иерингом, а подробно изучен только к начале XX в. Фернандец (Fernandez, 1909, 1913) изучил образование ОБ у южной формы (D. hybridus), а Ньюмен и Паттерсон (Newman а.Patterson, 1909; Patterson, 1913, 1927; Newman, 1923) — у техасского броненосца (D. novemcinctus). Этот последний был изучен подробнее, и потому мы его и рассмотрим в качестве примера. В пользу однояйцевости его близнецов прежде всего говорит тот факт, что возникновение их сопряжено с образованием в яичнике только одного желтого тела (Newman, 1923), что обычно связано с выходом одного яйца из фолликула, который и превращается в желтое тело яичника. Развитие яйца прослежено от поздних стадий дробления до полного развития близнецов (Patterson, 1913). В период половой активности, в августе, из оплодотворенного яйца начинает развиваться зародыш. В яйцеводах самки в это время можно найти самые ранние стадии эмбриогенеза, до бластоцисты включительно, т. е. до стадии полой сферы, ограниченной слоем клеток (трофобластом) с утолщением в одном участке — зародышевым узелком, из которого возникает сам зародыш (рис. 106).
Бластоцнста, попав в матку, не сразу внедряется в ее стенку, а несколько недель остается неимплантированной. Это «период покоя», когда развитие, по-видимому, почти полностью останавливается. Осенью, после прикрепления к стенке матки, развитие бластоцисты возобновляется, при этом часть стенки бластоцисты превращается в плаценту, а в зародышевом узелке дифференцируются экто- и энтодерма (рис. 107). В разросшейся эктодерме развивается полость — это амниотическая полость, над ней возникает другая полость — внеамниотическая, и под амниотической полостью — желточный мешок; верхнюю стенку его образует энтодерма. На дне амниотической полости эктодерма утолщается — из нее в дальнейшем образуется зародышевый диск; это тот участок, где возникает сам зародыш. Полость амниона сплющивается и образует два боковых выроста, которые в дальнейшем в свою очередь раздваиваются. Так получается центральный участок амниотической полости и четыре ветви ее (рис. 108). В каждой из них затем возникает по первичной полоске, т. е. закладывается ось зародыша. Все оси, как лучи, обращены к общему центру, головным концом к нему (рис. 107, 3). В дальнейшем все четыре зародыша вытягиваются в длину, головы их обращены в противоположную от плаценты сторону. Таким образом, появлению зародышей близнецов предшествует своеобразное «почкование» амниотической полости с повторным удвоением. Несколько иначе протекает процесс разветвления амниотического пузыря у южного вида броненосца, где выросты («почки») возникают как бы беспорядочно, в разной последовательности, и оказываются различного размера и неодинаково расположенными по отношению друг к другу (рис. 109).
Ньюмен считал, что «период покоя» бластоцисты до имплантации, сопровождающийся остановкой или задержкой развития, и есть причина образования близнецов у броненосцев, по аналогии с опытами Стокарда на рыбах. Против этого объяснения говорят многочисленные наблюдения на других млекопитающих — барсуках (Fischer, 1931), медведях (Verschuer, 1932), соболе (Наумов и Лавров, 1941),кунице (Enders a. Pearson, 1943), у которых бластоцисты также имеют «период покоя», однако ОБ у этих животных неизвестны. По-видимому, «почкование» амниотического пузыря у данных двух видов броненосцев есть не случайное явление, а нормальное видовое наследственное свойство. В реализации его «период покоя» может играть лишь роль одного из нужных условий (Gaullery. 1945).