— Хелатирующие агенты связывают ионы металлов, предотвращая их участие в нежелательных реакциях, — ответил я. — Это может остановить денатурацию белков и сохранить их активную конформацию.
— Отлично, — одобрил Дэвис. — А в каких случаях это особенно важно?
— При работе с ферментами или другими биологически активными молекулами, которые чувствительны к присутствию металлов, — продолжил я, мысленно применяя эти знания к своим экспериментам.
После уроков я направился к зданию университета. Договорился встретиться с Трис возле библиотеки — она обещала помочь с одним сложным вопросом по органической химии. Формально это касалось школьного проекта, но на самом деле мне нужны были ее знания для совершенствования мутагена.
Трис уже ждала у входа в библиотеку, читая учебник по биохимии. Сегодня она выглядела гораздо лучше, чем накануне — румянец вернулся на щеки, глаза были ясными и живыми. Видимо, вчерашний вечер действительно помог ей расслабиться.
— Привет, Питер! — поприветствовала она с искренней улыбкой. — Как дела в школе?
— Обычная рутина, — ответил я, подходя ближе. — А как ты себя чувствуешь? Головные боли прошли?
— Намного лучше, — кивнула Трис. — Кажется, мне просто нужно было отвлечься от проблем. Спасибо за вчерашний вечер.
— Не стоит благодарности, — улыбнулся я. — Готова помочь с моим химическим вопросом?
— Конечно, — согласилась она. — Пойдем в библиотеку, там тише и есть доступ к справочникам.
Мы прошли в читальный зал и заняли столик в дальнем углу, где можно было говорить, не мешая другим. Трис достала свои конспекты и учебники, а я — блокнот с заранее подготовленными вопросами.
— Итак, — начал я, — меня интересует стабилизация белковых комплексов при их модификации. Скажем, если добавить к природному белку синтетические фрагменты, как предотвратить его денатурацию?
Трис заинтересованно подняла бровь:
— Сложная задача. Зависит от типа белка и модификаций. А это для какого проекта?
— Исследую возможности создания улучшенных ферментов для медицинских целей, — ответил я, что было близко к истине. — Например, ферментов, которые могли бы ускорить регенерацию тканей.
— Интересно, — кивнула Трис. — В таком случае ключевой вопрос — сохранение активного центра фермента при добавлении новых функциональных групп.
Она открыла учебник на разделе о белковой химии и начала объяснять:
— Во-первых, нужны буферные системы, которые поддерживают оптимальный pH. Во-вторых, криопротекторы — вещества, защищающие белки от повреждений при заморозке-разморозке.
— А что насчет хелатирующих агентов? — спросил я, вспоминая урок химии.
— Да, ЭДТА или другие хелаторы обязательны, — согласилась Трис. — Они связывают ионы металлов, которые могут катализировать окисление и денатурацию.
Она сделала несколько набросков молекулярных структур в моем блокноте, объясняя механизмы стабилизации.
— Также важны антиоксиданты — аскорбиновая кислота, токоферол. И восстанавливающие агенты типа дитиотреитола для сохранения дисульфидных связей.
— А если белок сам по себе нестабилен? — продолжил я. — Можно ли как-то укрепить его структуру?
— Можно попробовать кросс-линкеры, — задумчиво ответила Трис. — Глутаральдегид, формальдегид. Они создают дополнительные ковалентные связи между аминокислотными остатками.
— Но это же может изменить активность белка? — заметил я.
— Верно, поэтому нужны мягкие условия и низкие концентрации, — кивнула она. — Или обратимые кросс-линкеры, которые можно удалить после стабилизации структуры.
Мы проработали вопрос почти час. Трис оказалась отличным преподавателем — объясняла сложные концепции простыми словами, приводила практические примеры. Ее знания были именно тем, что мне нужно для совершенствования мутагена.
— Знаешь, — сказала она, закрывая учебник, — ты задаешь очень продвинутые вопросы для школьника. Эти темы обычно изучают на старших курсах университета.