Приложение 6
НИИ вакцины им. Мечникова РАМН. зав. Лабораторией доктор биологических наук Егорова Н.Б.
Изучалось влияние пребывания живых организмов в Пирамиде на реактивность организма к инфекции.
Исследования проводились на модельной инфекции мышей, вызываемой возбудителем S tiphimunum. Штамм 415. Белых беспородных мышей, весом 12-14 г, экспонировали в Пирамиде разное время и с различной кратностью. Через несколько суток мышей заражали внутрибрюшинно 4-мя 10-кратно возрастающими дозами S tiphimunum, начиная от 101 до 104 микробных клеток. Контролем служили мыши из той же партии, зараженные теми же дозами культуры, но не экспонированные в Пирамиде.
Достоверно установлено, что выживаемость мышей, экспонированных в Пирамиде, значительно превышает таковую в группе контрольных животных. При заражении меньшими дозами выжило 60% мышей, экспонированных в Пирамиде, в контроле - 7%. При заражении большими дозами выжило соответственно 30% экспонированных в Пирамиде мышей и 3% - в контроле.
Вывод - пребывание мышей в Пирамиде существенно способствует повышению их резистентности к последующему заражению S tiphimunum То есть можно говорить о мощном иммуномодулирующем воздействии на не специфическую реактивность организма животных.
Аналогичная картина наблюдалась при введении мышам различных канцерогенов. Мыши в опытной партии пили воду, экспонированную в Пирамиде. Контрольные животные пили обычную воду. Результат - вероятность появления опухолей у контрольных животных оказалась в несколько раз выше, чем у животных пивших воду, экспонированную в Пирамиде.
Приложение 7
НИИ «Графит», чл.-корр. РАН. профессор В. II. Костиков, д ф-м. н. А.С. Катасонов.
Выяснялось влияние воздействия поля Пирамиды на злектросопротивление углеродных материалов. Объект исследования - пиролитический углерод, получаемый осаждением продуктов пиролиза метана на графитовую подложку с температурой ~2100°С. Измерения проводились четырехзондовым методом, на постоянном токе, при нормальных условиях. Размер пластин -25x10x1 мм3, расстояние между потенциальными контактами - 3 мм. Измерительный ток плотностью -1500 мА/см2. До помещения в пирамиду злектросопротивление составляло - 5-7 мкОм м. После пребывания в пирамиде в течение суток электросопротивление увеличилось - в 2 раза. Эти изменения являются аномальными для пироуглерода. Даже нейтронное облучение с флюенсом -1019 н/см2 не дает изменения более 5 %.
При этом, во времени происходили изменения электросопротивления от + 100% до - 100% по синусоидальному закону. Кроме того, выявлено снижение электросопротивления кремния полупроводниковой чистоты с 105 Ом см до 104 Ом см и потеря высокотемпературной сверхпроводимости образцами после экспозиции в Пирамиде.
НИИ вирусологии им. Ивановского РАМН, академик РАМН С.М Клименко, д.м.н Н.Н Носик, д.м.н. Д.Н.Носик.
1) Проведено исследование воздействия поля пирамиды на лимфобластоидные клетки человека. В качестве источника поля пирамиды использовали воду, побывавшую в пирамиде, на которой затем готовили раствор питательной среды. Жизнеспособность клеток определяли окраской 0,4% трипанов ого синего (фирма Serva, Германия) и методом МТТ (фирма Sigma, США), со спектрофотометрией поглощения витального красителя. Уже на 10-е сутки опыта начиналось заметное (в несколько раз) увеличение количества клеток и процента жизнеспособности клеток в обработанной экспозиции, по сравнению с контролем.
Получены данные о стимулирующем воздействии питательной среды, приготовленной на воде, экспонированной в пирамиде, на жизнеспособность и пролиферативную активность клеток человека. Обнаружено увеличение времени сохранения жизнеспособности клеток, по сравнению с контролем. Так, на 11-е сутки эти значения были соответственно равны 1,2 млн/мл и 52% для контроля и 1,4 млн/мл и 88% для опыта. На 21-е сутки - 0,05 млн/мл и 2% для контроля и 0,3 мин/мл и 49% для опыта.
2) Там же проводилось исследование воздействия поля пирамиды на противовирусную активность иммуноглобулина. Объектом исследования служил веноглобулин - человеческий поливалентный иммуноглобулин для внутривенного введения (Пастер-Мерье, Франция), лиофилизированный. Исследования проводились на культуре диплоидных клеток фибробластов человека. Для определения противовирусной активности иммуноглобулина использовали вирус энцефаломиокардита мышей (ЕМС). Противовирусную активность препарата определяли по его способности защищать клетки человека от цитопатического действия вируса.
Веноглобулин растворяли, в соответствии с инструкцией, в дистиллированной воде до концентрации 50 мкг/мл. В исследовании препарат был испытан в двух концентрациях: 50 мкг/мл и 0,5 мкг/мл Аликвоты веноглобулина в обеих концентрациях были помещены в пирамиду. Веноглобулин вносили в клеточные культуры за 24 часа до заражения их вирусом. В диплоидных культурах фибробластов человека вирус ЕМС хорошо реплицируется, вызывая выраженный цитопатический эффект - инфекционный титр вируса достигал 5,0 lg ЦПД50. Веноглобулин в концентрации 50 мкг/мл значительно ингибировал размножение вируса и его титр достигал лишь 2,0 lg ТЦПД50 (степень ингибиции - 3,0 lg. При уменьшении концентрации препарата в 100 раз защитный эффект его уже не обнаруживался.
При использовании препарата веноглобулина в тех же концентрациях, но подвергнутому воздействию поля пирамиды, наблюдалась иная картина. В этом случае препарат в концентрации 50 мкг/мл подавлял размножение вируса ЕМС на 4,0 lg, но, что наиболее существенно, что и препарат в концентрации 0,5 мкг/мл обладал таким же ингибирующим эффектом. Таким образом, веноглобулин в концентрации 0,5 мкг/мл, не оказывающий защитного действия на клетки, после пребывания в пирамиде обладал вирусоингибирующим действием, более выраженным, чем препарат в 100 раз более концентрированный.
При дальнейших разведениях веноглобулина до концентрации 0,005 мкг/мл и 0,00005 мкг/мл с последующими экспозициями в пирамиде обнаружен выраженный противовирусный эффект - титр вируса ЕМС составил 1,0 lg ТЦПД50. Практически противовирусная активность веноглобулина перестала зависеть от его концентрации. Гематологический научный центр РАМН, профессор Макаров В.А.
Для изучения влияния воды, экспонированной в пирамиде, на свертывающую систему крови было проведено исследование влияния этого вещества на некоторые коагулологические показатели in vitro, с использованием крови доноров, а также стандартной нормальной и патологической, со сниженным уровнем факторов коагуляции лиофилизированной человеческой плазмы и лиофилизированной человеческой патологической плазмы, дефицитной по фактору VIII. Кроме того, было проведено изучение пирамидной воды ex vivo в эксперименте на кроликах.
Кровь доноров получали путем пункции кубитальной вены и стабилизировали 3,8% раствором цитрата натрия (Merck, Германия) в соотношении 9:1. У кроликов образцы крови для оценки коагулологических параметров забирали из краевой вены уха животного методом свободного падения капель. Для получения богатой тромбоцитами плазмы кровь центрифугировали в течение 10 минут при 1000 об/мин, после чего верхний слой плазмы переносили в другую пробирку, а остаток повторно центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об/мин для получения плазмы, не содержащей тромбоциты.
На одном из этапов исследовались возможные изменения со стороны свертывающей системы крови кроликов ex vivo при замене обычной питьевой воды на воду, экспонированную в пирамиде. Исследования проводились 14 суток. Кровь у кроликов забирали до начала потребления пирамидной воды, а также на 7 и 14 сутки после начала эксперимента. Число тромбоцитов определяли оптическим методом, предложенным В.Walkowiak и соавторами. Образец богатой плазмы разводили в 10 раз 0,01 М фосфатным буфером, содержащим 0,14 М NaCl (pH 7,3) и измеряли плотность в пластиковых кюветах при А800 против разведенной таким же образом бедной плазмы. Число тромбоцитов кролика до введения пирамидной воды было принято за 100 %. На 7-е сутки после начала эксперимента их количество возросло до 129 + 10%, а на 14-е сутки до 167 + 18%. Достоверно выявлено уменьшение протромбинового времени и увеличение числа тромбоцитов.