В Гродно и его окрестностях было основано 20 крупнейших в Беларуси мануфактур: золототкацкая, шелкоткацкая, суконная, полотняная, мебельно-столярная, чулочная, табачная, металлических и кожевенных изделий, оружейная, каретная и другие. В 1775–1781 годах здесь существовала медицинская школа, которая положила начало медицинскому образованию в Беларуси. Академию возглавлял французский ботаник и медик Жан Эммануэль Жилибер. Он основал ботанический сад, в котором росло около 2 тысяч растений. Сегодня это городской парк культуры и отдыха, который носит имя Жилибера.
До сегодняшнего дня сохранилась и действует аптека, в которой работал учёный. Сейчас в ней организован музей. Он располагается в двухэтажном здании — одной из самых старых построек города. Музейная экспозиция размещается в зале площадью 50 м2. Здесь находится обновлённая травяная лаборатория, имеется зал рецептов 19–20 веков, представлены различных видов и форм баночки и коробочки, в которых хранились и продавались лекарства. Экспозиция отражает богатую историю аптечного дела в Беларуси.
Большие беды принесла городу война 1812 года. Летом этого года наполеоновская армия захватила Гродно. Французы оккупировали Гродненскую губернию и установили свои порядки. Они забирали имущество граждан, разрушили 650 домов. В боях за освобождение города прославился партизанский отряд под предводительством Дениса Давыдова.
20 декабря 1812 года без единого выстрела и разрушений отряд освободил Гродно от наполеоновского войска. Город оккупировал австрийский корпус генерала Фрейлиха (4 тысячи человек конницы и пехоты, а также 30 орудий). Денис Давыдов смело приблизился к передовой неприятельской страже. Угрожая атаковать врага идущим за ним войском, если город не будет немедленно освобождён, он добился от австрийского генерала согласия на сдачу Гродно со всеми находящимися в нём запасами. Австрийцы, не желавшие сражаться за чуждые им интересы Наполеона, поспешно покинули город.
В 19 веке в Гродно усилились революционные настроения. Передовая молодёжь выступала против самодержавия, создавала тайные общества и студенческие кружки. Важным событием в истории Гродненщины стало восстание 1863–1864 годов, которое возглавил Кастусь Калиновский. Всего 2 месяца К. Калиновский был революционным комиссаром Гродненской губернии. Восстание было подавлено, а его участники и руководители жестоко наказаны. До сегодняшнего дня сохранились номера газеты «Мужыцкая прауда», которую К. Калиновский выпускал на родном белорусском языке.
Но идеи свободы всё больше захватывали население. Этому способствовало развитие культуры и образования, повышение грамотности. В 1896 году именно в Гродно была издана поэма «Тарас на Парнасе», которая в то время была очень популярна и передавалась для чтения из рук в руки в рукописях. Люди с удовольствием посещали театр и художественные выставки. Город стремительно расширялся, строилось много новых домов. Самым крупным предприятием Беларуси была Гродненская табачная фабрика, на которой в 1900 году работало около полутора тысяч человек. Развивалась также железная дорога. Она связывала город с Петербургом, Москвой, Украиной, портовыми городами Прибалтики, в первую очередь с Ригой.
Конец 19 — начало 20 века для Гродно — период быстрого экономического и культурного развития. В городе над Нёманом вспыхивает целое созвездие известных имён: польской писательницы Элизы Ожешко и белорусского поэта Максима Богдановича, создателя языка эсперанто Людвига Заменгофа и мастера-живописца с мировым именем Льва Бакста, известного учёного, хранителя гродненской старины Евстафия Орловского, богатыря-атлета Якуба Чеховского и многих других. Гродно достойно выдержало все испытания, которые принёс ему 20 век.
В 1914 году началась Первая мировая война. Гродно стало прифронтовым городом. Русская армия отступила, и на её место пришли немецкие войска. Захватчики собирались навсегда остаться в городе и сделать его полностью немецким. Но гродненцы оказывали сопротивление врагам. В ноябре 1918 года Первая мировая война закончилась, но немцы покинули город только весной 1919 года. После этого им овладевали то польские войска, то Красная Армия. В сентябре 1920 года (официально, по Рижскому миру, в марте 1921 года) Гродно оказалось под властью Польши и стало поветовым центром Белостокского воеводства. Тяжело пришлось жителям города. Не было работы, и они массово уезжали в другие страны. С 1921 по 1933 год за границу выехало около 3 тысяч человек. Люди боролись за свою свободу, за лучшую жизнь. Известные деятели этого времени — западнобелорусские коммунисты Семён Рак-Михайловский и Валентин Тавлай.