КАЖДЫЙ ПОЗИТИВЕН ПРИ ELISA (ИФА)-ТЕСТИРОВАНИИ НА ВИЧ
"На протяжении последних 6 лет я работал в лаборатории клинической иммунологии одного из наиболее престижных университетских госпиталей Нью-Йорка. Здесь я имел возможность лично выполнять и детально исследовать современные тесты, использующиеся для определения ВИЧ-статуса - ELISA (ИФА), Western Blot (иммуноблот) и ПЦР.
1. Разбавление сыворотки при использовании теcта ELISA
ELISA является тестом для определения антител, которые, как полагают, вырабатываются против Вируса Иммунодефицита Человека (ВИЧ). Для проведения этого теста, сыворотка [крови] пациента должна быть разбавлена специальным раствором в соотношении 1:400.
Необходимость такого необычно большого растворения сыворотки пациента [400 раз] удивила меня. В большинстве серологических тестов, выявляющих присутствие антител к микробам, используется чистая сыворотка [неразбавленная]. Например, в тестах, выявляющих антитела к вирусам гепатита А и В, вирусу коревой краснухи, сифилису, гистоплазме и криптококку, используется обычная сыворотка [неразбавленная]. (Важно заметить, что тест на антитела к ВИЧ Western Blot, также предусматривает разбавление плазмы в соотношении 1:50).
Возникают очевидные вопросы: что делает ВИЧ столь уникальным, что тестируемую сыворотку необходимо разбавить в соотношении 1:400 и что произойдет, если сыворотка не будет разбавлена?
2. Испытание теcта ELISA без разбавления сыворотки
Для того чтобы ответить на эти вопросы, я произвел эксперимент в медицинской лаборатории Йорктаун Хайтс (Yorktown Heights), находящейся в Нью-Йорке. При проведении этого эксперимента я использовал те же реагенты тест-систем, которые обычно используются при постановке теста ELISA в большинстве клинических лабораторий по всему миру.
Сначала я взял образцы крови, которые при разбавлении в соотношении 1:400 дали отрицательный результат на антитела к ВИЧ. Затем, используя точно те же образцы сыворотки, я произвел еще одно тестирование, но на этот раз не разбавляя их. Неразбавленные, они все были ВИЧ-положительными [!].
Я протестировал около 100 образцов, и всё время получал такой же результат. Я протестировал даже собственную кровь, которая при разбавлении 1:400 была негативной, но в соотношении 1:1 [неразбавленная] показывала положительную реакцию на ВИЧ. Я должен упомянуть, что за исключением моей собственной крови, все остальные образцы [крови пациентов] были получены от врачей, запрашивавших ВИЧ-тестирование. Таким образом, наиболее вероятно, что большинство образцов крови, протестированных мною, принадлежали лицам, подверженным риску СПИДа.
[Далее следовала таблица, иллюстрирующая то, как негативная реакция разбавленных в соотношении 1:400 образцов крови всегда изменяется на положительную, при постановке опыта с образцами 1:1, которую мы здесь рассматривать не будем].
3. Дискуссия
Возможны три объяснения того факта, что неразбавленный образец крови всегда реагирует положительно при тестировании ELISA:
3.1. Антитела присутствуют у каждого из нас
Общепринято во всем мире, что ВИЧ-тест ELISA определяет наличие антител к тому, что известно как ВИЧ. Поскольку все неразбавленные образцы крови реагируют положительно при тестировании ELISA, то можно предположить, что каждый человек имеет антитела к ВИЧ. И это подразумевает, что каждый человек подвергся воздействию ВИЧ-антигена. Это могло бы означать, что все мы подверглись воздействию вируса, который, как верят, является причиной СПИДа.
3.2. Каждый из нас имеет различный уровень антител к ВИЧ
Также общепринято во всем мире, что лицо, реагирующее положительно на антитела к ВИЧ, инфицировано смертоносным вирусом, который является причиной иммунодефицита. Таким образом, положительные реакции неразбавленных образцов сыворотки подразумевали бы, что каждый или, по крайней мере, все те образцы крови, которые я тестировал, включая мой собственный, заражены "смертоносным" вирусом. Только те образцы, которые реагируют в соотношении 1:400, имеют более высокий уровень "смертельной" инфекции, чем те, которые реактивны [положительны] только при неразбавленной сыворотке.
3.3. Тест не является специфичным для ВИЧ [т.е. не выявляет вирус]
Результаты, представленные здесь, могут также означать, что тесты, используемые для определения антител к ВИЧ, не являются специфичными для ВИЧ.
Интересен тот факт, что в некоторых странах, например в Великобритании, диагностика ВИЧ-статуса проводится только на основании [результатов] теста ELISA. Для этой цели не производится тестирование Western Blot или какие-либо иные тесты.
Существует только лишь один надлежащий путь установления чувствительности и специфичности данного теста - через золотой стандарт [четкое соответствие специфичных антител выделенному вирусу]. Однако, в связи с тем, что ВИЧ никогда не был изолирован как вирусный элемент, не существует и золотого стандарта для ВИЧ.
В связи с тем, что не существует научного доказательства факта специфичности теста ELISA к ВИЧ-антителам, позитивный тест может означать наличие неспецифичных или полиспецифичных антител. Эти антитела могут присутствовать во всех образцах крови. Они, наиболее вероятно, являются результатом стрессовой реакции и не имеют никакого отношения к каким бы то ни было ретровирусам, не говоря уже о ВИЧ. В этом случае, позитивный тест может быть мерилом уровня подверженностистрессогенному фактору или оксидативным агентам.
Неизбежный вывод состоит в том, что все положительные реакции на наличие антител к ВИЧ являются просто ложно положительными. Если никто не является ВИЧ-положительным, то те люди, чья реакция позитивна при тестировании ELISA, имеют какие-либо иные, отличные от ВИЧ, причины для такой реакции.
В связи с тем, что кровь людей реагирует положительно при проведении тестов, не являющихся специфичными для ВИЧ, пожалуйста, давайте остановим процесс навешивания на них ярлыков "ВИЧ-позитивные"".
Короче говоря, ВИЧ-тест ELISA может быть положительным для каждого человека в зависимости от уровня концентрации сыворотки тестируемой крови. Отсюда следует одно из двух: либо антитела к ВИЧ имеются у каждого человека в разном количестве (что невероятно, ибо тогда любого можно объявить носителем вируса СПИДа), либо тест не является специфичным для ВИЧ, т.е. не выявляет вирус (что вероятней всего). Действительно, существует множество причин (в т.ч. различные давно известные заболевания), вызывающих положительную реакцию ВИЧ-тестов.
И еще один нюанс: ловкие манипуляции с концентрацией сыворотки крови или ошибки при ВИЧ-тестировании позволяют назначить больным СПИДом любого.
Часть III
Из отзывов читателей нашей рассылки:
хм.... а как же тогда все эти статьи и передачи о том, что там-то и там-то заразили новорожденных СПИДом и т.д. и т.п????
Наталья Журавленко